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行业资讯
2019 年 10 月 10 日

灭菌的主要办法有哪些?

消毒和灭菌常常放在一起出现,但实际上,它们的定义是不太一样的。消毒是指杀死病原微生物,但不一定包括芽孢。而灭菌则可以杀死物体表面和内部所有微生物,达到无菌的状态。那么常用的灭菌办法有哪些呢?


1、温度,利用提高温度,来使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变形,从而达到灭菌作用。而低温则可以起到抑菌作用。

温度灭菌又可以分为干热灭菌法和湿热灭菌法。


干热灭菌法:

①   灼烧灭菌法,利用火焰直接将微生物烧死。优点是简单易行,效果显著。但使用的范围比较有限,容易烧毁物品,只适用于接种针、环、试管口及一些已经不能用的污染物品或实验动物尸体的灭菌。

②   干热囧器灭菌法,常用于实验室。把需要灭菌的物品放至烘箱,升温至160℃,持续一小时即可达到显著的灭菌效果。此方法适用于玻璃器皿、金属用具等。


湿热灭菌法:

温度一致时,湿热灭菌效果优于干热灭菌。一个是因为一旦细胞内蛋白质含水量升高,更容易变形。另一个是因为高温水蒸汽对于蛋白质有极强的穿透力,可以加速蛋白质变形导致死亡。

①   巴氏消毒法。巴氏消毒法一般是采用62℃、30分钟进行消毒。不采用更高温度,是因为有的食物会因为高温而破坏营养成分或影响质量,比如牛奶、啤酒等。而这个温度既可以杀死病原微生物,又能保证食物营养和风味不被破坏。

②   煮沸消毒法。直接将要消毒的物品放入清水中,煮沸15分钟,即可杀死病原微生物和部分芽孢。如果加入1%碳酸钠或2%石碳酸,效果更佳。该方法适合注射器、毛巾、解剖用具等的消毒。

③   间歇灭菌法。这是一种可以达到良好灭菌效果的方法。在煮沸情况下,虽然能杀死病原微生物,但可能存在部分芽孢不能清除干净。那么我们先将待灭菌的物品加热到100摄氏度,15分钟以上,杀死病原体之后,再冷却放入37摄氏度恒温箱过夜。残留的芽孢在适宜的条件下会萌发成营养体。然后我们继续重复上述步骤,大约三次之后,就可以将细菌连同芽孢清除干净。

但这个方法操作比较麻烦,耗费的时间也比较长。

④   加压蒸汽灭菌法。对于耐热、大体积培养基的灭菌,此法效果显著。同时对于玻璃器皿、工作服等物品的灭菌也适用。

具体的方法是将待灭菌的物品放至密闭加压蒸汽灭菌锅中,利用蒸汽加压,提高灭菌锅内蒸汽的沸点。当水温超过120摄氏度时,包括芽孢在内的微生物15分钟左右就可以灭杀干净。


需要注意的是,不同微生物对温度的抵抗能力不同。一般而言,50-65℃,10分钟左右即可杀死大部分病毒和营养体。但芽孢抗热能力会更强,比如嗜热脂肪芽孢杆菌,在121℃环境下,要12分钟才会被杀死。而同种微生物,幼龄菌会比老龄菌对热更敏感。

而微生物数量多寡,也会影响灭菌效果,数量越多,抗热性越强。

另外,培养基的成分和组成也会影响灭菌效果。一般而言,蛋白质、糖或脂肪的存在,会导致细菌抗热性增强。PH在7左右时,抗热性最强。不同盐类对灭菌效果也有一定影响,固体培养基比液体培养基灭菌时间长。


2、辐射。辐射消毒灭菌,操作比温度消毒简单,又避免了化学药剂可能造成的二次污染,运用广泛。常常在接种室、手术室、食品、药物包装室等应用。经过辐射后的食品,微生物被大量灭杀,再冷冻保存时,保质期可以大大延长。


3、过滤。利用滤孔比细菌还小的筛子,将液体培养基从筛子中过滤,留住微生物细菌,达到除菌的目的。但由于细菌大小不一,未必能过滤干净,存在改善空间。


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